破(po)碎(sui)率 定義,《生(sheng)物(wu)(wu)分(fen)(fen)離(li)(li)(li)與純化(hua)技(ji)術》授課教(jiao)(jiao)案 章 預(yu)處理(li)技(ji)術教(jiao)(jiao)學(xue)目的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)：熟(shu)(shu)悉(xi)(xi)生(sheng)物(wu)(wu)材料的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)預(yu)處理(li)過程,掌(zhang)握(wo)預(yu)處理(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)本(ben)(ben)(ben)質(zhi)；熟(shu)(shu)悉(xi)(xi)發(fa)酵(jiao)液(ye)過濾特(te)(te)性的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)改變(bian)(bian)方(fang)法(fa)(fa),掌(zhang)握(wo)發(fa)酵(jiao)液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)相(xiang)對純化(hua)方(fang)法(fa)(fa)；熟(shu)(shu)悉(xi)(xi)凝(ning)(ning)聚的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)原(yuan)理(li)；掌(zhang)握(wo)絮凝(ning)(ning)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)本(ben)(ben)(ben)原(yuan)理(li)和影(ying)響(xiang)(xiang)因(yin)素；掌(zhang)握(wo)絮凝(ning)(ning)劑的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)選擇(ze)方(fang)法(fa)(fa)；了解細胞(bao)壁(bi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)結(jie)構特(te)(te)點(dian)；熟(shu)(shu)悉(xi)(xi)細胞(bao)破(po)碎(sui)儀(yi)器的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)使用特(te)(te)性；掌(zhang)握(wo)細胞(bao)破(po)碎(sui)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)；熟(shu)(shu)悉(xi)(xi)離(li)(li)(li)心(xin)分(fen)(fen)離(li)(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)本(ben)(ben)(ben)原(yuan)理(li)；掌(zhang)握(wo)影(ying)響(xiang)(xiang)離(li)(li)(li)心(xin)分(fen)(fen)離(li)(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)因(yin)素；掌(zhang)握(wo)離(li)(li)(li)心(xin)分(fen)(fen)離(li)(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)與設備。教(jiao)(jiao)學(xue)：生(sheng)物(wu)(wu)材料的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)預(yu)處理(li)過程、發(fa)酵(jiao)液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)相(xiang)對純化(hua)方(fang)法(fa)(fa)；絮凝(ning)(ning)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)本(ben)(ben)(ben)原(yuan)理(li)和影(ying)響(xiang)(xiang)因(yin)素、細胞(bao)破(po)碎(sui)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)；離(li)(li)(li)心(xin)分(fen)(fen)離(li)(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)本(ben)(ben)(ben)原(yuan)理(li)；離(li)(li)(li)心(xin)分(fen)(fen)離(li)(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)與設備。教(jiao)(jiao)學(xue)難點(dian)：預(yu)處理(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)本(ben)(ben)(ben)質(zhi)；發(fa)酵(jiao)液(ye)過濾特(te)(te)性的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)改變(bian)(bian)方(fang)法(fa)(fa)、絮凝(ning)(ning)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)本(ben)(ben)(ben)原(yuan)理(li)和影(ying)響(xiang)(xiang)因(yin)素、細胞(bao)破(po)碎(sui)儀(yi)器的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)使用特(te)(te)性、離(li)(li)(li)心(xin)分(fen)(fen)離(li)(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)本(ben)(ben)(ben)原(yuan)理(li)。教(jiao)(jiao)學(xue)課時(shi)：12 學(xue)時(shi)教(jiao)(jiao)學(xue)方(fang)法(fa)(fa)：多媒體教(jiao)(jiao)學(xue)教(jiao)(jiao)學(xue)內容： 節 概述1.生(sheng)物(wu)(wu)材料的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)預(yu)處理(li)過程一般有以(yi)下幾個步驟：①動物(wu)(wu)組織和器官要先除去結(jie)締組織、脂肪等非活性部(bu)分(fen)(fen),然后(hou)絞(jiao)碎(sui),

破(po)(po)碎(sui)率 定(ding)義(yi),孔德(de)志, 張其光(guang), 張丙(bing)印, 孫 遜( 清華(hua)大學(xue)水(shui)利水(shui)電(dian)工程(cheng)系(xi), 水(shui)沙(sha)科(ke)學(xue)與水(shui)利水(shui)電(dian)工程(cheng)國家實驗(yan)(yan)室, 北京 100084)收稿日期: 基(ji)金項目: 國家自然科(ke)學(xue)基(ji)金資助項目 ( ) 高等(deng)博(bo)士學(xue)科(ke)點專項科(ke)研(yan)基(ji)金資助課題( )作(zuo)者簡介: 孔德(de)志( 1978—), 男( 漢), 江(jiang)蘇, 博(bo)士研(yan)究生。通訊聯(lian)系(xi)人: 張丙(bing)印, 教授, Email: byzhang@ t singhua. edu. cn摘(zhai) 要: 天(tian)然堆石料的(de)顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li)破(po)(po)碎(sui)率不易準確(que)測量。為精確(que)測量堆石料的(de)顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li)破(po)(po)碎(sui)率, 對人工模擬(ni)堆石料進行(xing)了顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li)破(po)(po)碎(sui)三(san)軸試(shi)驗(yan)(yan)研(yan)究, 并(bing)對試(shi)驗(yan)(yan)后試(shi)樣顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li)破(po)(po)碎(sui)的(de)情況進行(xing)了詳細篩(shai)分(fen)和統計(ji)。結果表明: 破(po)(po)碎(sui)顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li)可分(fen)為殘(can)缺顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li)和完全(quan)破(po)(po)碎(sui)顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li), 兩(liang)者的(de)質量分(fen)數存在(zai)冪函數關系(xi)。現有的(de)多(duo)粒(li)(li)(li)徑指仍可作(zuo)為顆(ke)(ke)(ke)粒(li)(li)(li)破(po)(po)碎(sui)的(de)影(ying)響參量使用, 而單一(yi)粒(li)(li)(li)徑破(po)(po)碎(sui)指標(biao)B 15、B

破(po)(po)碎(sui)(sui)率 定(ding)義(yi),第三章(zhang)、微生(sheng)物(wu)(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)破(po)(po)碎(sui)(sui) 微生(sheng)物(wu)(wu)的(de)(de)(de)代謝(xie)產(chan)物(wu)(wu)有(you)的(de)(de)(de)分(fen)泌到細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)或組(zu)織之(zhi)外, 稱為(wei)(wei)胞(bao)(bao)(bao)外產(chan)物(wu)(wu)。(例如細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)菌(jun)產(chan)生(sheng)的(de)(de)(de)堿(jian)性蛋(dan)白(bai)酶(mei)(mei),霉 菌(jun)產(chan)生(sheng)的(de)(de)(de)糖(tang)化(hua)酶(mei)(mei)等(deng)) 還有(you)許(xu)多是存在于(yu)(yu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內(nei)(例如青霉素(su)酰化(hua)酶(mei)(mei),堿(jian) 性磷(lin)酸酯酶(mei)(mei)等(deng))稱為(wei)(wei)胞(bao)(bao)(bao)內(nei)產(chan)物(wu)(wu)。 對于(yu)(yu)胞(bao)(bao)(bao)外產(chan)物(wu)(wu)只(zhi)需直(zhi)接將(jiang)發酵液(ye)預處理及過濾(lv), 獲得澄清(qing)的(de)(de)(de)濾(lv)液(ye),作為(wei)(wei)進一(yi)(yi)步純(chun)化(hua)的(de)(de)(de)出(chu)發原液(ye), 對于(yu)(yu)胞(bao)(bao)(bao)內(nei)產(chan)物(wu)(wu),則需首先收集菌(jun)體(ti)進行細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)破(po)(po)碎(sui)(sui), 使(shi)代謝(xie)產(chan)物(wu)(wu)轉(zhuan)入液(ye)相(xiang)中,然后,再進行細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)碎(sui)(sui)片 的(de)(de)(de)分(fen)離。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)壁(bi)(bi)(bi)的(de)(de)(de)組(zu)成和(he)(he)結構 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)破(po)(po)碎(sui)(sui)是為(wei)(wei)了破(po)(po)壞細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外圍使(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內(nei)含 物(wu)(wu)釋放出(chu)來。微生(sheng)物(wu)(wu)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外圍通常(chang)包括(kuo) 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)壁(bi)(bi)(bi)和(he)(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜。 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜使(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內(nei)外保持一(yi)(yi)定(ding)的(de)(de)(de)濃度差(cha),它 主要(yao)由(you)蛋(dan)白(bai)質和(he)(he)脂質組(zu)成,強(qiang)度比較差(cha), 易受(shou)滲透壓沖擊而破(po)(po)碎(sui)(sui)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)破(po)(po)碎(sui)(sui)的(de)(de)(de)主要(yao) 阻(zu)力來自于(yu)(yu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)壁(bi)(bi)(bi)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)菌(jun)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)壁(bi)(bi)(bi) 幾乎所有(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)菌(jun)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)壁(bi)(bi)(bi)都(dou)是由(you)堅固的(de)(de)(de)骨架肽 聚糖(tang)組(zu)成,是由(you)肽聚糖(tang)鏈借(jie)短肽交(jiao)聯而成,使(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi) 胞(bao)(bao)(bao)具有(you)一(yi)(yi)定(ding)的(de)(de)(de)形狀和(he)(he)強(qiang)度。 短肽一(yi)(yi)般由(you)四(si)或五(wu)個氨(an)基(ji)酸組(zu)成

破(po)碎(sui)(sui)(sui)率 定(ding)義(yi),經干燥后(hou)(hou)的(de)菌(jun)體(ti)(ti),其細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜的(de)滲透性發生(sheng)變(bian)化(hua),同時(shi)部分(fen)菌(jun)體(ti)(ti)會(hui)產生(sheng)自溶(rong),然后(hou)(hou)用(yong)丙酮、丁醇或緩沖液等溶(rong)劑(ji)處理時(shi),胞(bao)(bao)(bao)內(nei)物質會(hui)被(bei)抽提出(chu)來(lai)。破(po)碎(sui)(sui)(sui)率定(ding)義(yi)為被(bei)破(po)碎(sui)(sui)(sui)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)數(shu)量占原(yuan)始細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)量的(de)百(bai)分(fen)比(bi)數(shu),即： Y(%)=[(N0N)/N0] 100N0－原(yuan)始細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)量N－經t時(shi)間(jian)操作后(hou)(hou)保留下來(lai)的(de)未損害完整細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)量目(mu)前N0和N主要通過(guo)下面(mian)的(de)方法(fa)獲得 ： 直接(jie)計(ji)數(shu)法(fa)在血球計(ji)數(shu)板(ban)用(yong)顯微鏡觀察,直接(jie)對適當稀釋后(hou)(hou)的(de)樣品(pin)進行計(ji)數(shu)。間(jian)接(jie)計(ji)數(shu)法(fa)間(jian)接(jie)計(ji)數(shu)法(fa)是(shi)在細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)破(po)碎(sui)(sui)(sui)后(hou)(hou),測定(ding)懸(xuan)浮液中細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)釋放出(chu)來(lai)的(de)化(hua)合物的(de)量（例如可溶(rong)性蛋白(bai)(bai)、酶等）。通過(guo)做法(fa)是(shi)將破(po)碎(sui)(sui)(sui)后(hou)(hou)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)浮液離心(xin)分(fen)離掉(diao)固體(ti)(ti)（完整細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和碎(sui)(sui)(sui)片）,然后(hou)(hou)用(yong)Lowry法(fa)測量上清(qing)中的(de)蛋白(bai)(bai)質含量。在眾多的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)破(po)碎(sui)(sui)(sui)方法(fa)中 高壓均(jun)漿和珠磨兩種機械破(po)碎(sui)(sui)(sui)方法(fa),處理量大,速度(du)非常快,目(mu)前在工業生(sheng)長上應用(yong)廣泛。但在機械法(fa)破(po)碎(sui)(sui)(sui)過(guo)程中,容易產生(sheng)大量的(de)熱量,使料液溫(wen)度(du)升高,而易造(zao)成生(sheng)化(hua)物質的(de)破(po)壞,特別是(shi)在